期刊简介

               本刊为医药卫生类综合性学术期刊,国内外公开发行,是中国科技论文统计源期刊、中国核心期刊数据库来源期刊,并被万方数据库、中国学术期刊网等多家国内重要数据库收录。主要刊登栏目有论著、临床、交流、实验技术、短篇报告、中医中药、综述等医卫文章。                

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  • 杂志名称:广州医科大学学报杂志
  • 主管单位:广州医科大学
  • 主办单位:广州医科大学
  • 国际刊号:2095-9664
  • 国内刊号:44-1710/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:2000年在教育部主办的高校科技期刊评比中荣获优秀编辑出版质量奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
广州医科大学学报杂志2011年第02期

HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定

黄桂填;肖焕擎;曾山崎;徐波;蔡文松;李书华

关键词:人端粒酶逆转录酶启动, NK4基因, 腺病毒
摘要:目的:构建靶向结肠癌细胞的人端粒酶逆转录酶HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定.方法:根据GenBank中的HTERT启动子(HTERTp)序列设计引物,以人胚肾293细胞提取基因组DNA为模板,PCR扩增HTERTp,并将HTERTp序列克隆入pDC312质粒中,构建成HTERTp调控的腺病毒质粒pSG-HTERTp; NK4 cDNA酶切并回收克隆至pSG-HTERTp载体中,构建成pSG-HTERTp/pA-NK4穿梭质粒,脂质体法在293细胞中包装重组腺病毒;噬斑分析法筛选单克隆重组腺病毒;RT-PCR检测NK4基因的转录;Western Blot检测NK4蛋白的表达.结果:成功构建出成功构建出HTERT 启动子调控的NK4基因重组腺病毒,滴度为4.5×109空斑形成单位(pfu)/mL,且PCR扩增及westernbolt电泳均呈阳性表达.结论:成功构建出HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒,为进一步研究NK4基因的作用机制打下实验基础.